山东省立医院检验科——流式细胞术在淋巴瘤诊断中的应用

　　肿瘤是如何准确地检验诊断出来的?对于很多门外汉来说，这个问题简直太高深。而今天要介绍的这种技术就是临床淋巴系统肿瘤诊断和分型的有力工具。至于这个技术什么原理、怎么操作、效果如何，看完你就知道啦~

　　流式细胞术

　　流式细胞术(Flow Cytometry, 简称FCM)是一种可以对处在快速直线流动状态中的单细胞或生物微粒进行多参数、快速定量分析，同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术，具有快速、高通量、敏感性高、多参数分析等优点。

　　淋巴瘤是血液系统常见的恶性肿瘤之一， 在恶性肿瘤中的构成比逐年升高。骨髓涂片形态学检查是诊断淋巴瘤患者骨髓受累的重要手段，但敏感度低且受很多因素影响易漏检。淋巴瘤的病理诊断主要依赖淋巴结或淋巴系统所累及的组织或器官。如果早期淋巴瘤细胞尚未完全破坏组织结构，数量也不够多，又和正常淋巴细胞混杂在一起，做出精确诊断就有一定困难。流式与病理的不同之处在于可以做各种标本：血液、体液、组织、培养细胞等，即所有有活细胞的标本，均可做流式。由于淋巴瘤细胞单克隆性的特点，用流式细胞仪通过辨别正常与肿瘤细胞群的免疫表型特征，可以实现对淋巴系统肿瘤的诊断以及分型。

　　FCM 对B 细胞淋巴瘤的鉴别主要是通过特异性的抗原表达，例如反应性B 淋巴细胞增多表现为正常的免疫表型。而某些B 细胞淋巴瘤有轻链的限制性表达及特异的免疫表型。T 细胞淋巴瘤的鉴别较困难，主要是通过T 细胞表面共同抗原缺失、表达减弱、异常的抗原表达及TCRvβ鉴别良恶性。研究显示比较容易侵犯骨髓的淋巴瘤有 SLL/CLL、LPL、SMZL、PTCL、HSTCL、MCL、BL，侵犯率在60%～100%， 而ALCL、 NK/T鼻型、HL较低。

　　FCM开始成为临床淋巴系统肿瘤诊断和分型的有力工具，尤其是对于单纯淋巴细胞增多或者淋巴结肿大病理未能确诊为淋巴瘤的患者，FCM可以作为有力的证据确切地分析检测结果，发掘和诠释流式图上一些细胞群免疫表型的重要信息，对临床淋巴瘤诊断、指导治疗、评估预后愈来愈重要。

　　典型病例

　　男性患者，55岁，因查体发现脾大3年，厌食、腹胀伴乏力20天，门诊以“自身免疫性肝炎?”收入院。2年前于当地医院查肝抗原谱示“抗线粒体亚型-2抗体(+)，半年前于青岛大学附属医院行骨穿，骨髓形态学图文报告示：增生骨髓象，粒红比倒置;异性淋巴占2.5%，成熟淋巴占4.5%，巨核数多，血小板少见;骨髓活检示：骨髓增生较活跃，粒红比例略升高，粒系细胞各阶段可见，以偏成熟为主。并见少量淋巴细胞、浆细胞。入我院后为进一步明确诊断，行骨髓穿刺检查，骨髓报告：骨髓及外周血可见一类形态异常淋巴细胞，分别占17%、10%，淋巴瘤细胞待排。免疫分型结果：异常单克隆成熟B细胞占有核细胞17.68%，该类细胞表达CD19、CD20bri、CD103、CD11c、CD79b、CD22、HLA-DR、cKappa，部分表达CD23、CD25、不表达CD10、CD138、CD38、CD5、CD34、cKi-67、cLambda、cZAP70，考虑毛细胞白血病可能性大。

　　毛细胞白血病是一种少见的慢性B淋巴细胞恶性增殖性疾病，常有骨髓和脾脏的浸润。在形态上不易与其他小B细胞淋巴瘤相鉴别，流式检测免疫学标志该类细胞特异表达CD103、CD11c、CD25。通过骨髓形态学结合免疫分型可以明确恶性细胞的性质，对临床诊断疾病提供及时准确得诊断报告，为病人明确诊断、规范治疗奠定了基础。